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一、题文
〔11分〕〔2021·东北三省名校联考〕受损伤马铃薯细胞内酚氧化酶〔PPO〕和底物〔酚类物质〕直接接触,可引起马铃薯褐变,为探究温度对PPO活性影响,实验小组进展了如下实验:〔1〕PPO粗提取液提取:低温下将新鲜马铃薯用蒸馏水洗净、去皮,取20 g样品放入含50 mL磷酸缓冲液〔pH为5.5〕研钵中,同时参加少量石英砂,研磨、离心,上清液即PPO粗提液,加缓冲液研磨目是__________________________________________________________________。〔2〕不同温度下PPO活性测定:步骤试管1试管2试管3试管4试管5试管6试管7试管8PPO粗提液2 mL2 mL2 mL2 mL酚类底物2 mL2 mL2mL2 mL反响混合振荡混合振荡混合振荡混合振荡温度预处理0 ℃15 ℃30 ℃45 ℃保温时间5 min5 min5 min5 min记录结果+++++++++++①实验步骤顺序有不妥之处,请改正:_____________________________________________________________________________________________________。②实验结果说明:15 ℃和30 ℃条件下,PPO具有一样活性,从酶特性分析其原因是________________________________________________________。③为进一步探究PPO最适温度,应在 范围内设置温度梯度。解析 解答此类问题需注意弄清实验原理和目;遵循实验对照原那么和单一变量原那么;弄清实验正确操作顺序,保证实验结果准确性和可信度。〔1〕过酸、过碱都会使酶失活,加缓冲液使溶液pH保持相对稳定,从而保持PPO活性。〔2〕①“温度预处理〞之后进展“反响〞,才能保证各个试管是在相应不同温度下起反响,从而保证实验结果准确性,使测定PPO活性更准确可信。②③15 ℃和30 ℃条件下,PPO具有一样活性,从酶特性分析其原因:在酶最适温度前后,可以有两个不同温度对应一样催化效率。所以,要探究PPO最适温度,应在15~30 ℃范围内设置温度梯度。
二、解答
答案 〔1〕保持PPO活性〔防止PPO失活〕 〔2〕①“反响〞步骤改在“温度预处理〞之后 ②在酶最适温度前后,可以有一样催化效率 ③15~30 ℃本文到此结束,希望对大家有所帮助。